III. Otras disposiciones. CONSEJO DE SEGURIDAD NUCLEAR. Comunidad Autónoma de Cataluña. Convenio. (BOE-A-2020-7129)
Resolución de 24 de junio de 2020, del Consejo de Seguridad Nuclear, por la que se publica el Convenio con la Universidad Autónoma de Barcelona, para la ejecución del proyecto "Susceptibilidad individual de riesgo asociado con la edad ante exposición a dosis bajas y moderadas de radiación".
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BOLETÍN OFICIAL DEL ESTADO
Núm. 182
Jueves 2 de julio de 2020
Sec. III. Pág. 46673
En la Figura 4 se resume el diseño experimental del primer objetivo, que incluye la
obtención de las células objeto de estudio (BPECs, breast primary epithelial cells) a partir
de tejido mamario sano, el diseño y producción de los vectores lentivirales necesarios para
la posterior modificación de las células, la infección de los cultivos celulares con los
vectores lentivirales generados y su posterior selección mediante citometría gracias a la
expresión de proteínas fluorescentes asociadas al gen de interés, el cultivo de las células
premalignas y su irradiación con dosis bajas y moderadas de rayos X. El grado de
transformación adquirido por las células tras la irradiación se valorará mediante distintos
ensayos de la cinética de crecimiento de las células irradiadas, de su capacidad de
proliferación independiente de sustrato, de la pérdida de polaridad de las estructuras
acinares en cultivos tridimensionales y de la adquisición de cambios en el transcriptoma de
las células irradiadas característicos de células transformadas.
SV40‐LT + hTERT
Cèl∙lula sana
SV40‐LT + hTERT+
H‐Ras
Radiación
ionitzante
Cinética
crecimiento
Anchorage
Assay
Ensayo 3D
PAM 50
3.1
Obtención de las células.
En nuestro laboratorio hemos obtenido células epiteliales mamarias (BPECs) a partir
de tejido de mamario normal de diversas donantes (mamoplastias estéticas) utilizando las
metodologías descritas por Ince et al (2007). Este modelo experimental es relevante ya
que las BPECs transformadas completamente con los tres elementos genéticos descritos
cve: BOE-A-2020-7129
Verificable en https://www.boe.es
Figura 4. Esquema de la metodología experimental completa para el desarrollo de los objetivos que se proponen
Núm. 182
Jueves 2 de julio de 2020
Sec. III. Pág. 46673
En la Figura 4 se resume el diseño experimental del primer objetivo, que incluye la
obtención de las células objeto de estudio (BPECs, breast primary epithelial cells) a partir
de tejido mamario sano, el diseño y producción de los vectores lentivirales necesarios para
la posterior modificación de las células, la infección de los cultivos celulares con los
vectores lentivirales generados y su posterior selección mediante citometría gracias a la
expresión de proteínas fluorescentes asociadas al gen de interés, el cultivo de las células
premalignas y su irradiación con dosis bajas y moderadas de rayos X. El grado de
transformación adquirido por las células tras la irradiación se valorará mediante distintos
ensayos de la cinética de crecimiento de las células irradiadas, de su capacidad de
proliferación independiente de sustrato, de la pérdida de polaridad de las estructuras
acinares en cultivos tridimensionales y de la adquisición de cambios en el transcriptoma de
las células irradiadas característicos de células transformadas.
SV40‐LT + hTERT
Cèl∙lula sana
SV40‐LT + hTERT+
H‐Ras
Radiación
ionitzante
Cinética
crecimiento
Anchorage
Assay
Ensayo 3D
PAM 50
3.1
Obtención de las células.
En nuestro laboratorio hemos obtenido células epiteliales mamarias (BPECs) a partir
de tejido de mamario normal de diversas donantes (mamoplastias estéticas) utilizando las
metodologías descritas por Ince et al (2007). Este modelo experimental es relevante ya
que las BPECs transformadas completamente con los tres elementos genéticos descritos
cve: BOE-A-2020-7129
Verificable en https://www.boe.es
Figura 4. Esquema de la metodología experimental completa para el desarrollo de los objetivos que se proponen
